嘔吐**DON檢測試劑盒說明書
適用
Beacon脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒利用競爭酶聯**吸附原理定量檢測小麥,大麥,麥芽,玉米及燕麥中的嘔吐**。
檢測原理
Beacon脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒是基于競爭性酶聯**吸附檢測法(普天酶標儀檢測嘔吐**)。用水震蕩萃取粉碎樣品中的DON,過濾水相萃取物,然后進行**學檢測。加入嘔吐**的酶標記物到已加有標準或樣品的測試孔中,抗體被加入后反應開始,樣品及酶標記物競爭結合連接在微孔上的抗體,10分鐘培養后,倒掉孔中的溶液,洗掉微孔中未的結合嘔吐**和酶標記物。加入無色的底物溶液,培養5分鐘,所有結合的酶標記物使底物轉化成藍色物質。加入停止液然后讀取吸光度值,未知濃度樣品與標準吸光度值進行比較,就可以得到樣品的嘔吐**濃度。
特異性
Beacon脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒對于脫氧雪腐鐮刀菌烯醇有很強的特異性,以下表格展示了與其他形式的交叉反應率。
復合物 交叉反應率
3-acetyl-deoxynivalenol >1%
15-acetyl-deoxynivalenol <300%
LOD(*低檢測限) 100ppb
LOQ(*低定量限) 200ppb
試劑及材料
若試劑盒保存在2-8℃,未拆開包裝的試劑盒在標識的保質期之前均可放心使用。
1. 真空包裝,包含干燥劑的8×12的微孔板。
2. 5瓶2ml濃度為0,0.2,0.5,1.0,2.5 ug/ml(ppm)的DON標準品,(注意:因為谷物樣品在萃取過程中1:5稀釋,標準品實際上為設定標準濃度的1/5,原始樣品的濃度無需換算。)
3. 1瓶8ml的酶標記物。
4. 1瓶8ml的鼠抗DON抗體。
5. 1瓶14ml的底物溶液
6. 1瓶14ml的停止液(注意:1N 鹽酸,小心操作!)
7. 1包洗液粉末。
8. 操作說明書
注意事項
1. 每種試劑*適用于Beacon DON試劑盒。其他生產商的試劑不可替代本試劑盒中的任何試劑,不同批次之間的試劑不可混用。
2. 試劑的稀釋及污染以及程序中未提及的樣品,均會導致結果失真。
3. 不可使用過期試劑。
4. 開始實驗前試劑回溫到室溫(20-28℃),避免試劑在室溫存放過久(>24小時)。
5. DON為極毒物質,將所有丟棄的液體倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的實驗器具必須在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小時,戴上手套穿上防護服以避免皮膚及黏膜與試劑或樣品萃取物接觸,如果一旦接觸,必須立即用大量水沖洗。
6. 停止液為1N 鹽酸,避免皮膚及黏膜接觸,如果有噴灑,立即**并用大量水沖洗,
所需材料(不提供)
1. 實驗室用蒸餾水或去離子水
2. 100ml量筒
3. 用于萃取樣品及收集萃取液玻璃器皿
4. 濾紙,Whatman GF/A及相當者
5. 可吸取50ul容量的移液器及一次性吸頭
6. 可吸取50ul或100ul的八道移液器及一次性吸頭
7. 吸水紙
8. 450nm的普天酶標儀(型號:PT-3502)
9. 計時器
更多食品**檢測試劑盒說明書資料詳見:
http://sandiegoallergies.com/shopstyle/downloads.html
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